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在實驗時怎樣挑選到適合自己試驗的抗體呢？
發(fā)布時間： 2019-10-22 點擊次數(shù)： 2202次一、關于特異性的選擇：特異性的選擇首要需求考慮四個方面：蛋白特異性、種屬特異性、實驗方法特異性、符號物的特異性。
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1、蛋白特異性：針對需求檢測的蛋白查找抗體，幾個細節(jié)要差異，重組表達的蛋白和內源性蛋白的檢測，對抗體的要求是不相同的，留心檢查抗體闡明書的檢測闡明。假定重組蛋白不是全長表達，則需求留心抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內。
2、種屬特異性：同種蛋白不同物種，有著或大或小的差異。現(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的，根據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)作穿插反應。需求參照闡明書注明的可反應種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體，能夠通過蛋白的序列比對，選擇同源序列免疫的抗體。
3、實驗方法特異性：現(xiàn)在運用抗體的實驗方法有許多，不同的運用方法過程中，由于對蛋白樣品的處理方法不相同，蛋白的含量有差異，對抗體的辨認表位和效價要求都是不相同的。具體的根據(jù)闡明書注明的產品應用方法進行選擇。
4、符號物的特異性一般根據(jù)實驗操作的實驗方法不會運用帶有符號的一抗，比方WB、IHC等，都是通過二抗類的試劑符號抵達效果出現(xiàn)的目的。可是根據(jù)儀器剖析的一些實驗，或許就會運用到直接符號的一抗，比方流式實驗。那么需求了解到自己行將運用的儀器能檢測到的熒光規(guī)模，不通的參數(shù)要求選擇對應的符號物。在免疫熒光雙標實驗中，需求選配不同的熒光物。