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容易讓ELISA試劑盒變質(zhì)的因素
發(fā)布時間： 2018-01-04 點(diǎn)擊次數(shù)： 1635次ELISA試劑盒為什么會蛻變呢？是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保？一旦蛻變會有什么影響呢？
1.辦法學(xué)的影響
ELISA測定形式包含以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競賽抑制法，其中競賽抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不公平競賽等要素的影響，成果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難操控。
2.試劑要素
不同批次的ELISA試劑在制造進(jìn)程中很難確保質(zhì)量*一致，即使是經(jīng)過批批檢的項(xiàng)目其檢測成果也存在差異，因而有必要挑選和訂貨長批號的試劑，并確保保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因試劑批號改動而從頭樹立質(zhì)控系統(tǒng)及從頭評價試劑的雜亂進(jìn)程，而且可以確保成果的穩(wěn)定性；關(guān)于效期短、使用率低的試劑，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，防止重復(fù)凍融形成試劑的失效。
3.ELISA試劑盒樣本要素
標(biāo)本干擾要素包含內(nèi)源性干擾要素和外源性干擾要素，前者包含類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包含標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲存時刻過長、標(biāo)本凝結(jié)不全、冷凍標(biāo)本的重復(fù)凍融等。
4.操作要素
ELISA操作進(jìn)程雜亂，操作不妥將引起較大的差錯。加樣、溫育、洗刷、顯色、比色。
5.灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下，ELISA定性試驗(yàn)以“陽性”和“陰性”來報告成果，兩者間有一條分界線被稱為“陽性判別值”(cut-off value，CO值)，這是定性免疫測定成果報告的根據(jù)。
6.標(biāo)本復(fù)查
ELISA手藝檢測進(jìn)程雜亂，影響要素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而形成成果的差異，因而加大復(fù)查力度是確保成果準(zhǔn)確性的牢靠辦法，比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑、弱陽性標(biāo)本及罕見形式的檢測成果進(jìn)行復(fù)查。
7.ELISA試劑盒常表明成果的常用辦法
a.定性測定
b.半定量測定 成果一般以滴度表明。
c.定量測定 即用已知量的規(guī)范品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定，制作規(guī)范曲線，成果以量或單位表明。在ELISA定量檢測中每一塊反響板都有必要制作相應(yīng)的規(guī)范曲線。
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